高中生物知識(shí)點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)專題1

來源：昭通市正道中學(xué) 發(fā)布時(shí)間：2014-05-28 11:12:12 瀏覽：8918

一、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、呈像原理、放大倍數(shù)計(jì)算方法

結(jié)構(gòu)：

光學(xué)部分：目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器（有大小光圈）和反光鏡（有平面鏡和凹面鏡）

機(jī)械部分：鏡座、傾斜關(guān)節(jié)、鏡臂、載物臺(tái)（上有通光孔、壓片夾）、鏡頭轉(zhuǎn)換器、粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。

注：目鏡無旋轉(zhuǎn)螺絲，鏡頭越長，放大倍數(shù)越?。晃镧R有旋轉(zhuǎn)螺絲，鏡頭越長，放大倍數(shù)越大。

呈像原理：映入眼球內(nèi)的是倒立放大的虛像。（物鏡質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度）

放大倍數(shù)：目鏡和物鏡二者放大倍數(shù)的乘積）

注：顯微鏡放大倍數(shù)是指直徑倍數(shù)，即長度和寬度，而不是面積。

二、顯微鏡的使用：置鏡（裝鏡頭）→對(duì)光→置片→調(diào)焦→觀察

1．安放。顯微鏡放置在桌前略偏左，距桌緣8—10cm處，裝好物鏡和目鏡（目鏡5× 物鏡10×）

2．對(duì)光。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，選取較大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡，同時(shí)把反光鏡轉(zhuǎn)向光源，直至視野光亮均勻適度。調(diào)節(jié)視野亮度只可用遮光器和反光鏡，光線過強(qiáng)，改用較小光圈或用平面反光鏡；光線過弱，改用較大光圈或用凹面反光鏡。選低倍鏡→選較大的光圈→選反光鏡（左眼觀察）

3．觀察。將切片或裝片放在載物臺(tái)上，標(biāo)本正對(duì)通光孔中心。轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋（順時(shí)針），俯首側(cè)視鏡筒慢慢下降，直到物鏡接近切片（約0.5cm），左眼觀察目鏡，（反時(shí)針）旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒慢慢上升，看到物像時(shí)輕微來回旋轉(zhuǎn)細(xì)準(zhǔn)焦，直到物像清晰。（找不到物像時(shí)，可重復(fù)一次或移動(dòng)裝片使標(biāo)本移至通光孔中心）。．觀察時(shí)兩眼都要睜開，便于左眼觀察，右眼看著畫圖。側(cè)面觀察降鏡筒→左眼觀察找物像→細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)清晰

4．高倍鏡的轉(zhuǎn)換。找到物像后，把要觀察的物像移到視野中央，把低倍鏡移走，換上高倍鏡，只準(zhǔn)用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，直到物像清楚為止。

順序：移裝片→轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器→調(diào)反光鏡或光圈→調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋

注：換高倍物鏡時(shí)只能移動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換鏡后，只準(zhǔn)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦和反光鏡（或光圈）。

問1：低倍鏡換為高倍鏡后，若看不到或看不清原來的像，可能原因？（ABC）

A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反，蓋玻片在下面 D、未換目鏡

問2：放大倍數(shù)與視野的關(guān)系：

放大倍數(shù)越小，視野范圍越大，看到的細(xì)胞數(shù)目越多，視野越亮，工作距離越長；

放大倍數(shù)越大，視野范圍越小，看到的細(xì)胞數(shù)目越少，視野越暗，工作距離越短。

故裝片不能反放。

5．裝片的制作和移動(dòng)：制作：滴清水→放材料→蓋片

移動(dòng)：物像在何方，就將載玻片向何處移。（原因：物像移動(dòng)的方向和實(shí)際移動(dòng)玻片的方向相反）

6．污點(diǎn)判斷：1）污點(diǎn)隨載玻片的移動(dòng)而移動(dòng)，則位于載玻片上；

2）污點(diǎn)不隨載玻片移動(dòng)，換目鏡后消失，則位于目鏡；換物鏡后消失，則位于物鏡；

3）污點(diǎn)不隨載玻片移動(dòng)，換鏡后也不消失，則位于反光鏡上。

7．完畢工作。使用完畢后，取下裝片，轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器，逆時(shí)針旋出物鏡，旋進(jìn)鏡頭盒；取出目鏡，插進(jìn)鏡頭盒，蓋上。把顯微鏡放正。

實(shí)驗(yàn)一：觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布（必修一P26）

一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法

二．實(shí)驗(yàn)原理：

1．甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。

2．鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色休中的DNA和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。

三．方法步驟：

操作步驟	注意問題	解釋
取口腔上皮細(xì)胞制片	載玻片要潔凈，滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞將載玻片在酒精燈下烘干	防止污跡干擾觀察效果保持細(xì)胞原有形態(tài) 消毒為防止感染，漱口避免取材失敗固定裝片
水解	將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸溶液中，用300C水浴保溫5min	改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，促進(jìn)染色體的DNA與蛋白質(zhì)分離而被染色
沖冼涂片	用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S	洗去殘留在外的鹽酸
染色	滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min
觀察	先低倍鏡觀察，選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域，移至視野中央，調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察	使觀察效果最佳

實(shí)驗(yàn)二檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)（必修一P18）

一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span> 嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

二．實(shí)驗(yàn)原理：某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。

1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。如：

加熱

葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（磚紅色）+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。淀粉遇碘變藍(lán)色。

3．蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。）

三．實(shí)驗(yàn)材料

1．做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因?yàn)榻M織的顏色較淺，易于觀察。）

2．做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡3~4小時(shí)（也可用蓖麻種子）。

3．做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。

四、實(shí)驗(yàn)試劑

斐林試劑（包括甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液：質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液）、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水。